Temat zajęć fakultatywnych: "Technika Western Blot - metoda służąca do rozdziału białek"

1. Osoba odpowiedzialna za przeprowadzenie danego tematu: dr n. med. Małgorzata Borzym-Kluczyk
2. Jednostka uczelniana odpowiedzialna za nauczanie przedmiotu: Zakład Biochemii Farmaceutycznej UMB
3. Kierownik Zakładu: dr n. med. Marzanna Cechowska-Pasko
4. Wymiar godzinowy zajęć: 15 godz.
5. Forma zakończenia zajęć: zaliczenie na podstawie obecności i aktywnego udziału w zajęciach
6. Cel nauczania jest pokazanie przydatności techniki Western blot do jakościowej analizy białek Zajęcia skierowane są do studentów Farmacji oraz Analityki Medycznej.
7. Formy nauczania: Seminaria
8. Program nauczania

Omówienie techniki Western-blot

Przygotowanie próbek

Rozdział białek na żelu poliakrylamidowym

Transfer białek z żelu na membranę nitrocelulozową

Immunoblotting

• blokowanie miejsc niespecyficznych
• inkubacja ze specyficznymi dla poszukiwanego białka przeciwciałami

Detekcja

Analiza jakościowa otrzymanych wyników

Literatura:

1. Burnette, W.N. Western Blotting: Electrophoretic transfer of proteins from sodium dodecyl sulfate-połyacrylamide gels to unmodified nitrocellulose and radiographic detection with antibody and radioiodinated protein A. Anal. Biochem. 1981; 112, 195-203.
2. Pilonetto DV, Pereira NF, Bitencourt MA, Magdalena NI, Vieira ER, Veiga LB, Cavalli IJ, Ribeiro RC, Pasquini R; FANCD2 Western blot as a diagnostic tool for Brazilian patients with Fanconi anemia; Brazilian Journal of Medical and Biological Research. (2009).