Tematy ćwiczeń z BIOLOGII MOLEKULARNEJ dla studentów II roku kierunku Farmacji
Podstawowe techniki uzyskiwania materiału do badań molekularno-genetycznych
Uzyskiwanie, transport i przechowywanie materiału biologicznego do izolacji kwasów nukleinowych
Podstawowe techniki izolacji kwasów nukleinowych (organiczna, adsorbcyjna, magnetyczna)
Ocena stężenia i czystości roztworów kwasów nukleinowych (spektrofotometryczna, fluorescencyjna, elektroforetyczna)
Elektroforeza kwasów nukleinowych
Wykorzystanie urządzeń do automatycznej izolacji DNA i RNAAmplifikacja kwasów nukleinowych
Zasady reakcji PCR
Projektowanie primerów i profilu termicznego reakcji PCR
Przygotowanie mieszaniny reakcyjnej do reakcji PCR
Analiza produktów PCR (elektroforetyczna)
Główne rodzaje reakcji PCR i ich zastosowanie (nested PCR, RT-PCR, multiplex PCR)
Klonowanie DNA – podstawowe etapy postępowania oraz analiza schematów eksperymentalnych
Transformacja komórek – zasady metody i interpretacja wyników na podstawie danych przykładowychPCR w czasie rzeczywistym
Zasady PCR w czasie rzeczywistym
Sposoby znakowania produktów PCR – za pomocą barwników fluorescencyjnych
Hybrydyzacja kwasów nukleinowych
Charakterystyka i projektowanie sond hybrydyzacyjnych
PCR w czasie rzeczywistym z sondami hybrydyzacyjnymi – zasady i zastosowanie (PCR ilościowy, detekcja mutacji punktowych)
Zastosowanie hybrydyzacji kwasów nukleinowych w analizach (blotting, mikromacierzy)
Wykorzystanie ilościowego PCR w czasie rzeczywistym (Q-RT-PCR) do oceny ekspresji genów na poziomie RNA
Analiza i interpretacja wyników oceny ekspresji genów
Wyciszenie aktywności genów – podstawy teoretyczne i analiza danych przykładowychTechniki molekularne analizy sekwencji kwasów nukleinowych
Sekwencjonowanie DNA techniką terminacji syntezy łańcucha
Pirosekwencjonowanie
Wykorzystanie mikromacierzy do sekwencjonowania DNA
Wysoceprzepustowe techniki sekwencjonowania DNA – sekwencjonowanie następnej generacji (NGS)
Ocena sekwencji DNA z zastosowaniem technik wykrywania znanych mutacji i polimorfizmów genetycznychZastosowanie bioinformatyki w badaniach molekularno-genetycznych
Zbiory bioinformatyczne danych molekularno-genetycznych
Wyszukiwanie informacji
Podstawowe narzędzia bioinformatyczne do analizy danych badań mikromacierzowych i NGS
Analiza i interpretacja danych uzyskanych w badaniach genomu i transkryptomu
Opracowywanie i przedstawianie wyników analiz molekularno-genetycznych z wykorzystaniem narzędzi informatycznych

